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ELISA是免疫確診中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的盛行癥、寄生蟲病及非盛行癥等方面的免疫確診。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)現(xiàn)已運(yùn)用的效果,以為ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡(jiǎn)略、快速、安穩(wěn)及易于自動(dòng)化操作等特征。不只適用于實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的檢測(cè),而且因?yàn)橐惶熘畠?nèi)可以檢測(cè)幾百乃至上千份標(biāo)本,因而,也適合于血清盛行病學(xué)查詢。本法不只可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種前期確診的杰出方法。
1、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分彼此吸附,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;
2、抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3、酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因而,可以按底物顯色的程度閃現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果。
因?yàn)?/span>ELISA試劑盒一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又因?yàn)槊阜?hào)抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)作反應(yīng),發(fā)生擴(kuò)展效果,正因?yàn)榇朔N擴(kuò)展效果而使本法具有很高的靈敏性。因而,ELISA試劑盒是一種既靈敏又特異的方法。
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