如何保證ELISA試劑盒的質(zhì)量

一、辦法學(xué)的影響

ELISA測定模式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競賽抑制法，其中競賽抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的平競賽等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。

二、試劑要素

不同批次的ELISA試劑在制造進(jìn)程中很難確保質(zhì)量一致，即使是經(jīng)過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異，因而必須選擇和訂貨長批號(hào)的試劑，并確保保存條件。嚴(yán)厲執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號(hào)改動(dòng)而從頭樹立質(zhì)控系統(tǒng)及從頭評(píng)估試劑的雜亂進(jìn)程，并且可以確保成果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，防止重復(fù)凍融造成試劑的失效。

三、樣本要素

標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素，ELISA試劑盒前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。

四、操作要素

ELISA操作步驟雜亂，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

 五、灰區(qū)的設(shè)置

通常情況下，ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來陳述成果，兩者間有一條分界線被稱為

“陽性判斷值"(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定成果陳述的依據(jù)。

六、標(biāo)本復(fù)查

ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂，影響要素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成成果的差異，因而加大復(fù)查力度是確保成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見模式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。

第七、常表明成果的常用辦法

1.定性測定

2.半定量測定 成果一般以滴度表明。

3.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，制作規(guī)范曲線，成果以jue對量或單位表明。在ELISA試劑盒定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。