購(gòu)買抗體時(shí)關(guān)于特異性的挑選

特異性的挑選首要需求考慮四個(gè)方面：蛋白特異性、種屬特異性、試驗(yàn)方法特異性、符號(hào)物的特異性。

1、蛋白特異性：

針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體，幾個(gè)細(xì)節(jié)要區(qū)分，重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè)，對(duì)抗體的要求是不一樣的，注意檢查抗體說明書的檢測(cè)說明。假如重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá)，則需求注意抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。

內(nèi)源性蛋白能清楚其剪切與潤(rùn)飾的方式，特殊表型的蛋白需求進(jìn)行序列比對(duì)，并結(jié)合抗體免疫原序列，檢查穿插反應(yīng)的狀況。磷酸化蛋白檢測(cè)需求確認(rèn)具體位點(diǎn)，不同位點(diǎn)的磷酸化意味著或許有不同的機(jī)制存在，不宜混為一談。

2、種屬特異性：

同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性狀況與其他種屬發(fā)生穿插反應(yīng)。需求參照說明書注明的可反應(yīng)種屬信息。

一些稀有種屬很難找到抗體，可以經(jīng)過蛋白的序列比對(duì)，挑選同源序列免疫的抗體，不過一般這種狀況生產(chǎn)商不會(huì)受理其關(guān)于質(zhì)量的申述，假如可以申請(qǐng)到免費(fèi)的抗體樣品，則利于抗體挑選。。

3、符號(hào)物的特異性

一般基于試驗(yàn)操作的試驗(yàn)方法不會(huì)運(yùn)用帶有符號(hào)的一抗，比方WB、IHC等，都是經(jīng)過二抗類的試劑符號(hào)達(dá)到成果出現(xiàn)的意圖?？墒腔趦x器剖析的一些試驗(yàn)，或許就會(huì)運(yùn)用到直接符號(hào)的一抗，比方流式試驗(yàn)。那么需求了解到自己將要運(yùn)用的儀器能檢測(cè)到的熒光規(guī)模，針對(duì)不通的參數(shù)要求挑選對(duì)應(yīng)的符號(hào)物。在免疫熒光雙標(biāo)試驗(yàn)中，需求選配不同的熒光符號(hào)物。