熒光分析法

熒光分析法是指利用某些物質(zhì)被紫外光照射后處于激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)分子經(jīng)歷一個(gè)碰撞及發(fā)射的去激發(fā)過(guò)程所發(fā)生的能反映出該物質(zhì)特性的熒光，可以進(jìn)行定性或定量分析的方法。由于有些物質(zhì)本身不發(fā)射熒光（或熒光很弱），這就需要把不發(fā)射熒光的物質(zhì)轉(zhuǎn)化成能發(fā)射熒光的物質(zhì)。例如用某些試劑（如熒光染料），使其與不發(fā)射熒光的物質(zhì)生成絡(luò)合物，各種絡(luò)合物能發(fā)射熒光，再進(jìn)行測(cè)定。因此熒光試劑的使用，對(duì)一些原來(lái)不發(fā)熒光的無(wú)機(jī)物質(zhì)和有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行熒光分析打開(kāi)了大門(mén)，擴(kuò)展了分析的范圍。

特點(diǎn)：靈敏度更高

g/ml，應(yīng)用不如UV廣泛。

應(yīng)用：①直接熒光光度法

②作為HPLC的檢測(cè)器（用的多）

根據(jù)物質(zhì)分子吸收光譜和熒光光譜能級(jí)躍遷機(jī)理，具有吸收光子能力的物質(zhì)在特定波長(zhǎng)光（如紫外光）照射下可在瞬間發(fā)射出比激發(fā)光波長(zhǎng)長(zhǎng)的光，即熒光。

分子受特定光照射后處于激發(fā)態(tài)的

分子返回基態(tài)時(shí)發(fā)出熒光，其熒光強(qiáng)度與

呈線(xiàn)性關(guān)系，從而可測(cè)出氣體濃度。當(dāng)檢測(cè)儀器系統(tǒng)確定后，熒光總光強(qiáng)I與

濃度的之間的關(guān)系可表示為：

I=KC

在穩(wěn)定的條件下，這些參數(shù)也隨之確定，k可視為常數(shù)。因此，式中I=kC表示的紫外熒光光強(qiáng)I與樣氣的濃度C成線(xiàn)性關(guān)系。這是紫外熒光法進(jìn)行定量檢測(cè)的重要依據(jù)。

直接測(cè)定法

利用物質(zhì)自身發(fā)射的熒光進(jìn)行測(cè)定分析 [1]。

間接測(cè)定法

不管是直接測(cè)定，還是間接測(cè)定，一般的采用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)法，取各種已知量的熒光物質(zhì)，配成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定出這些標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度，然后給出熒光強(qiáng)度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度的工作曲線(xiàn)。在同樣的儀器條件下，測(cè)定未知樣品的熒光強(qiáng)度，然后從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)上查出未知樣品的濃度（即含量）。

一般常用的熒光分析儀器有：目測(cè)熒光儀（熒光分析燈）、熒光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)三種。