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人激酶錨定蛋白12(AKAP12) ELISA 試劑盒
ELISA試劑盒的原理
ELISA是一種基于抗原-抗體反應的檢測方法。在ELISA試劑盒中,已知的AKAP12抗體被固定在固相載體上,當加入待測樣本后,樣本中的AKAP12與固相抗體結合。然后加入酶標記的AKAP12抗體,與固相抗體上的AKAP12形成抗原-抗體復合物。最后加入底物顯色,根據(jù)顏色的深淺,即可判斷待測樣本中AKAP12的濃度。
ELISA試劑盒的使用步驟
1. 準備樣本:采集待測樣本,根據(jù)試劑盒說明書的要求進行適當?shù)奶幚怼?br style="box-sizing: initial; max-width: 100%;"/>2. 加樣:將處理后的樣本加入到ELISA板孔中,根據(jù)試劑盒說明書的要求控制加樣量。
3. 孵育:將ELISA板放入37℃孵育一定時間,使AKAP12與抗體結合。
4. 洗滌:按照試劑盒說明書的要求,將未結合的物質洗滌掉。
5. 酶標抗體加入:按照試劑盒說明書的要求,加入酶標記的抗體。
6. 孵育:再次將ELISA板放入37℃孵育一定時間。
7. 洗滌:再次按照試劑盒說明書的要求,將未結合的物質洗滌掉。
8. 顯色:加入底物顯色。
9. 終止反應:加入終止液,停止顯色反應。
10. 讀數(shù):用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值(OD值),根據(jù)OD值計算AKAP12的濃度。
人激酶錨定蛋白12(AKAP12) ELISA 試劑盒
注意事項
1. 使用前應仔細閱讀說明書,確保了解所有操作步驟和注意事項。
2. 確保試劑盒在有效期內且未開封使用過。如發(fā)現(xiàn)試劑盒損壞或過期,應立即停止使用。
3. 操作過程中應保持清潔衛(wèi)生,避免交叉污染。
4. 嚴格按照試劑盒說明書的要求進行加樣和孵育等操作,確保實驗結果的準確性。
5. 在顯色反應期間,應避免光線直接照射到ELISA板,以免影響實驗結果。
6. 在讀數(shù)時,應選擇合適的波長進行測量,確保實驗結果的準確性。
7. 如發(fā)現(xiàn)實驗結果異常或不符合預期,應重新進行實驗或咨詢專業(yè)人士的意見。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
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