人T細(xì)胞免疫球蛋白及粘蛋白域包含蛋白4(TIMD4) ELISA 試劑盒  

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

操作步驟

1. 樣品采集與處理

（1）血清：收集血液后，室溫放置30分鐘左右，待血液凝固后離心分離血清。

（2）血漿：收集血液后，加入適量抗凝劑（如EDTA），離心分離血漿。

（3）細(xì)胞培養(yǎng)上清液：收集細(xì)胞培養(yǎng)液，離心去除細(xì)胞殘骸，收集上清液。

2. 樣品稀釋

根據(jù)需要，將血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液進行適當(dāng)稀釋。

3. 加樣與溫育

（1）將稀釋后的樣品加入酶標(biāo)板孔中，每孔加入100μL。

（2）加入適量酶標(biāo)二抗，每孔加入100μL。

（3）將酶標(biāo)板放入37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

4. 洗板與顯色

（1）取出酶標(biāo)板，用洗滌液洗3次，每次5分鐘。

（2）加入底物液，每孔加入100μL，放入37℃恒溫箱中溫育15分鐘。

（3）加入終止液，每孔加入50μL，混勻。

5. 測定與結(jié)果計算

（1）用酶標(biāo)儀檢測各孔的光密度值（OD值），波長為450nm。

（2）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與OD值的對應(yīng)關(guān)系，計算出樣品濃度。

人T細(xì)胞免疫球蛋白(TIMD4) ELISA 試劑盒 

試劑盒組成

結(jié)果計算

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

人T細(xì)胞免疫球蛋白(TIMD4) ELISA 試劑盒  

免責(zé)聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。