人P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

試劑盒性能

1. 特異性高：由于是抗原抗體的特異性結合，因此試驗的特異性很高，能夠排除其他物質(zhì)的干擾。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大提高，能夠檢測出微量的抗原或抗體。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易掌握，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實驗原理

      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒組成

人P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素)，阻止非特異性蛋

白質(zhì)結合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或抗體的樣本。

4)洗滌:去除未結合的物質(zhì)。

5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標記檢測抗體。

6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測抗體。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。

標本的采集及保存

1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結果分析

根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值，利用標準品繪制的標準曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算得到待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。