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輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 更新時(shí)間:2024-09-08

簡(jiǎn)要描述:質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物不僅全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。您只需提供代測(cè)樣本,七個(gè)工作日內(nèi)即可為您提供代測(cè)數(shù)據(jù)。輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法歡迎前來(lái)咨詢,訂購(gòu)。

產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng): 輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法

測(cè)定方法: 微量法

保存條件: 低溫避光保存

注意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無(wú)機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。

NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;在340 nm下測(cè)定NADPH增加速率。可反映出NADK活性的大小。

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

樣本測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

測(cè)試盒注意事項(xiàng):

影響顯色反應(yīng)的主要因素有哪些?

影響顯色反應(yīng)的主要因素有顯色劑的用量、溶度的酸度、顯色時(shí)間以及干擾離子等。

為了使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度,如何選擇 的測(cè)量條件?

一般從以下幾個(gè)方面來(lái)考慮:

⑴選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)量波長(zhǎng)。一般根據(jù)測(cè)試盒待測(cè)組分的吸收光譜選擇 吸收波長(zhǎng)作為測(cè)量波長(zhǎng)。如果干擾組分在 吸收波長(zhǎng)也有吸收,則應(yīng)根據(jù)“吸收大,干擾小"的原則選擇波長(zhǎng)。

⑵調(diào)價(jià)溶液的溶度,或選用不同厚度的吸收池,控制被測(cè)吸光度在0.2-0.8范圍內(nèi)。

⑶選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芏取?/span>

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

5、回收試驗(yàn): X =103.3%。

6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

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