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簡(jiǎn)要描述:高質(zhì)量?jī)?yōu)化的篤瑪生物ELISA試劑盒使您能夠從容、可靠和一致地測(cè)量靶標(biāo)特異性蛋白質(zhì)??商峁┒喾N ELISA試劑盒規(guī)格,包括完整的、即用型試劑盒以及可DIY預(yù)優(yōu)化試劑。ELISA試劑盒和抗體對(duì)可用于一系列不同的物種,包括人類、小鼠、大鼠、非人類靈長(zhǎng)類、犬、豬、牛、馬。人S100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2) ELISA 試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
1. 抗體或抗原的吸附:將待測(cè)抗原或抗體吸附到固相載體上,常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團(tuán),能夠與待測(cè)抗原或抗體特異性結(jié)合。
2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合:將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測(cè)抗原或抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力,能夠與待測(cè)抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
3. 底物顯色反應(yīng):當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時(shí),酶能夠催化底物分解,產(chǎn)生顏色變化。通過測(cè)量顏色的變化程度,可以判斷待測(cè)抗原或抗體的濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時(shí)
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號(hào)的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
操作步驟
1. 包被:將抗原溶液加入聚苯乙烯酶標(biāo)板孔中,包被抗原,37℃孵育1小時(shí)。
2. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。
3. 阻斷:加入阻斷液,37℃孵育30分鐘,以封閉酶標(biāo)板上的非特異性結(jié)合位點(diǎn)。
4. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。
5. 加樣:加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,37℃孵育1小時(shí)。
6. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)。
7. 加酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體,37℃孵育1小時(shí)。
8. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。
9. 顯色:加入TMB底物溶液,37℃孵育15-30分鐘。
10. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顯色反應(yīng)。
11. 檢測(cè):在450nm波長(zhǎng)下讀取吸光度值(OD值)。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本試劑盒的使用說明,確保所有材料、器具和試劑準(zhǔn)備齊全。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,請(qǐng)務(wù)必遵循實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作,并注意控制實(shí)驗(yàn)條件的一致性。
3. 實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)勿觸摸酶標(biāo)板上的酶標(biāo)抗體區(qū)域,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后請(qǐng)及時(shí)清洗并整理實(shí)驗(yàn)器具,避免交叉污染。
5. 本試劑盒僅供體外診斷使用,使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書,如有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術(shù)人員。
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試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
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人S100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2) ELISA 試劑盒
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