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更新時間：2024-09-09簡要描述：上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機(jī)構(gòu)提供各類品質(zhì)過硬，價格實惠，售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術(shù)，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，相關(guān)活動信息可聯(lián)系客服。人抑瘤素M(OSM) ELISA 試劑盒
實驗原理
1. 抗原抗體反應(yīng)
ELISA試劑盒中的抗原或抗體被固定在固相載體上，當(dāng)加入待測樣本時，樣本中的抗原或抗體與固相載體上的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物。
2. 酶標(biāo)記物的結(jié)合
將酶標(biāo)記物與特異性抗體或抗原結(jié)合，形成酶標(biāo)記抗體或抗原。酶標(biāo)記物在反應(yīng)中起到催化作用，加速反應(yīng)進(jìn)程，提高檢測靈敏度。
3. 酶促反應(yīng)
在酶標(biāo)記物與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合后，加入底物溶液，底物在酶的催化下發(fā)生氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。顏色深淺與待測樣本中的抗原或抗體濃度成正比。
4. 吸光度檢測
將反應(yīng)體系中的吸光度進(jìn)行測量，通過比較標(biāo)準(zhǔn)品溶液與待測樣本溶液的吸光度值，即可計算出待測樣本中的抗原或抗體濃度。
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本xi釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體 | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示，溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
實驗步驟
1. 樣品收集與處理
（1）根據(jù)需要收集不同種類的樣品，如血清、血漿、尿液等。
（2）對于血清和血漿樣品，將采集的血液靜置一段時間后，離心分離出血清或血漿。
（3）對于尿液樣品，收集尿液后，可直接進(jìn)行檢測。
2. 樣品稀釋
根據(jù)試劑盒說明，對需要稀釋的樣品進(jìn)行適當(dāng)比例的稀釋。
3. 加樣
（1）按照試劑盒說明，分別將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測樣品加入相應(yīng)的孔中。
（2）每孔加入50μL，輕輕震蕩混勻。
4. 封閉
根據(jù)試劑盒說明，加入適量的封閉液，覆蓋板孔，并輕輕震蕩混勻。封閉液一般為含有一定濃度的非特異性結(jié)合配體的溶液，可以降低非特異性結(jié)合的影響。
5. 洗滌
（1）將板孔洗滌液加入到每個孔中，輕輕震蕩，然后倒掉洗滌液。重復(fù)洗滌3次，每次用洗滌液充分洗滌
（2）最后一次洗滌后，用紙巾輕輕吸干板孔表面的水分。
6. 酶標(biāo)二抗加入及孵育
（1）根據(jù)試劑盒說明，將酶標(biāo)二抗加入相應(yīng)的孔中。
（2）孵育一定時間后，將板孔中的溶液倒掉。
7. 洗滌與顯色
（1）重復(fù)步驟5的洗滌過程。
（2）加入顯色劑，孵育一定時間后，將板孔中的溶液倒掉。
8. 終止反應(yīng)與讀數(shù)
（1）加入終止液，終止酶促反應(yīng)。
（2）用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值（OD值）。
人抑瘤素M(OSM) ELISA 試劑盒
結(jié)果判斷
1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。
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