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猴晶體蛋白(CLC)酶聯(lián)免疫試劑盒
ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結(jié)合,因此試驗(yàn)的特異性很高,能夠排除其他物質(zhì)的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗(yàn)的靈敏度大大提高,能夠檢測(cè)出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡(jiǎn)便:ELISA試驗(yàn)操作相對(duì)簡(jiǎn)單,容易掌握,適合于大規(guī)模樣本檢測(cè)。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測(cè)各種抗原、抗體和激素等生物分子。
實(shí)驗(yàn)原理
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,通過(guò)酶對(duì)底物反應(yīng)的顯色反應(yīng),對(duì)樣本中的待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、適用范圍廣等特點(diǎn),因此在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和食品安全檢測(cè)等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1. 抗原和抗體的儲(chǔ)存:應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求存放抗原和抗體,避免反復(fù)凍融和長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫環(huán)境中。同時(shí)要保證試劑盒未過(guò)期,以獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2. 加樣技術(shù):加樣時(shí)應(yīng)保證加入的體積準(zhǔn)確且不產(chǎn)生氣泡,避免加在孔壁的邊緣,以免影響與固相表面的接觸。加樣時(shí)應(yīng)在每孔的旁邊放置一個(gè)加樣對(duì)照孔,以監(jiān)測(cè)加樣的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
3. 溫育:溫育是ELISA實(shí)驗(yàn)中的重要步驟,溫育時(shí)間和溫度的控制對(duì)于抗原抗體反應(yīng)的進(jìn)行和結(jié)果的影響至關(guān)重要。必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行溫育,并注意保持恒溫狀態(tài)。
4. 洗滌:洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中的一步,它可以去除未結(jié)合的物質(zhì),提高檢測(cè)的特異性和靈敏度。洗滌時(shí)應(yīng)保證每次洗滌時(shí)間充足,并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時(shí)要避免在洗滌過(guò)程中產(chǎn)生氣泡,以免影響洗滌效果。
猴晶體蛋白(CLC)酶聯(lián)免疫試劑盒
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時(shí)
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號(hào)的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說(shuō)明書提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
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實(shí)驗(yàn)步驟
1. 準(zhǔn)備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復(fù)至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應(yīng)孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時(shí)。
4. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標(biāo)二抗:每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應(yīng):每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取各孔的光密度值。
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過(guò)計(jì)算得到待測(cè)樣品的濃度。
售后
試劑盒售后:本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量,質(zhì)量問(wèn)題均可免費(fèi)退換,另提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。
細(xì)胞售后:
1、細(xì)胞運(yùn)輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2、細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題,請(qǐng)?zhí)峁┘?xì)胞照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟,并跟我公司人員及時(shí)溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我或者隨貨說(shuō)明書相關(guān)售后條款。
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