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猴泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)免疫試劑盒
ELISA試劑盒的優(yōu)點
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結合,因此試驗的特異性很高,能夠排除其他物質的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大提高,能夠檢測出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易掌握,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。
實驗原理
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種基于抗原抗體反應的免疫學檢測方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結合,通過酶對底物反應的顯色反應,對樣本中的待測物質進行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強、操作簡便、適用范圍廣等特點,因此在生物醫(yī)學研究、臨床診斷和食品安全檢測等領域得到了廣泛應用。
實驗注意事項
1. 抗原和抗體的儲存:應嚴格按照說明書要求存放抗原和抗體,避免反復凍融和長時間暴露在高溫環(huán)境中。同時要保證試劑盒未過期,以獲得可靠的實驗結果。
2. 加樣技術:加樣時應保證加入的體積準確且不產(chǎn)生氣泡,避免加在孔壁的邊緣,以免影響與固相表面的接觸。加樣時應在每孔的旁邊放置一個加樣對照孔,以監(jiān)測加樣的準確性和重復性。
3. 溫育:溫育是ELISA實驗中的重要步驟,溫育時間和溫度的控制對于抗原抗體反應的進行和結果的影響至關重要。必須嚴格按照說明書要求進行溫育,并注意保持恒溫狀態(tài)。
4. 洗滌:洗滌是ELISA實驗中的一步,它可以去除未結合的物質,提高檢測的特異性和靈敏度。洗滌時應保證每次洗滌時間充足,并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時要避免在洗滌過程中產(chǎn)生氣泡,以免影響洗滌效果。
猴泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)免疫試劑盒
準備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設置好振板器、洗板器
9.準備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標準品
11.配制不同濃度的標準品
12.配制質控品
13.根據(jù)預實驗結果稀釋樣本
14.準備好封板膜
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實驗步驟
1. 準備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標準品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標二抗:每孔加入50μl酶標二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應:每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數(shù):用酶標儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
結果分析
根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值,利用標準品繪制的標準曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
售后
試劑盒售后:本公司出售的試劑盒均保質保量,質量問題均可免費退換,另提供免費代測服務。
細胞售后:
1、細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2、細胞收到當天以及第2,3天請拍照,未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內出現(xiàn)問題,請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關操作的詳細步驟,并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我或者隨貨說明書相關售后條款。
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