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猴α1連接素(CTNNα1)酶聯(lián)免疫試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:
  • 更新時間:2024-09-09

簡要描述:上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機構(gòu)提供各類品質(zhì)過硬,價格實惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,相關(guān)活動信息可聯(lián)系客服。
猴α1連接素(CTNNα1)酶聯(lián)免疫試劑盒

產(chǎn)品詳情

本試劑盒只供體外研究使用,不用于臨床診斷 


猴α1連接素(CTNNα1)酶聯(lián)免疫試劑盒    



本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿等。 

有效期:6 個月 

保存條件:2-8℃ 




試劑盒組成: 


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備注: 



1. (96T/48T)打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全。 

2. 標準品濃度依次為:200、100、50、25、12.5、0 μg/mL 

3. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提 供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取 50μL 樣本上樣即可。 當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本希釋液 將標本進行適當稀釋后再進行實驗。 


檢測前準備工作: 


1. 請?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。 

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象; 放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。 可將 20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成 400ml 工作濃度的洗滌液,未用完的放回 4℃ 

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份 20× 洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水。


猴α1連接素(CTNNα1)酶聯(lián)免疫試劑盒  

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實驗原理: 


試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)。往預先包被的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP 標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物 TMB顯色,TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


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實驗所需自備試驗器材: 


1. 酶標儀(450nm) 

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、 200-1000uL 

3. 37℃恒溫箱 

4. 蒸餾水或去離子水 


樣本處理及要求: 


1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時 或 4℃過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或 將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 

2. 血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在 采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8℃ 1000×g 離心 15 分鐘,取上 清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免 反復凍融。 

3. 組織勻漿:用預冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除 殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重 后將組只剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS, 具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充 分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超 聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。

4. 細胞培養(yǎng)物上清:請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢 測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 

5. 其它生物標本:1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測。 

6. 樣品外觀:樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。 

7. 樣品保存:樣品收集后若在 1 周內(nèi)進行檢測的可保存于 4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃ (1 個月內(nèi)檢測),或-80℃(6 個月內(nèi)檢測),避免反復凍 融,標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進 行此項檢測。 


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注意事項: 


1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所 有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷 藏保存試劑。 

2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡 量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。 

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。 

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不 能使用。 

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。 

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。 

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強 烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物 活性。 

9. 不能使用過期產(chǎn)品。 

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的 程序處理樣品和檢測裝置。 


操作步驟:

 

1.從室溫平衡 60min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板 條用自封袋密封放回 4℃。 

2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準 品 50μL。 

3.樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。樣本不足, 或者樣本濃度過高,可用樣本希釋液做稀釋。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化 物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應 孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL), 靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。 

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 

7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處 測定各孔的 OD 值。 





實驗結(jié)果計算: 


繪制標準曲線:以所測標準品的 OD 值為橫坐標,標準品的濃 度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得 到直線回歸方程,將樣品的 OD 值代入方程,計算出樣品的濃 度。 



 試劑盒性能: 


1. 檢測范圍:1.32 μg/mL –200 μg/mL。 

2. 靈敏度:檢測濃度小于 0.78 μg/mL。 

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。 

4. 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10% ,板間變異系數(shù)小于 15% 。


 技術(shù)小提示: 


1. 當混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。 

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同 試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移 液槽。 

3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。 

4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色,請避光保存;假如 微孔板后,將由物色變成不同深度的藍色。 

5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致;加入終止液 后,孔內(nèi)顏色由藍變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體 未混勻;請充分混合。 


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說明: 


1. 由于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供 的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定 的質(zhì)量技術(shù)風險。 

2. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及 當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務必準備充足的標本備份。 

3. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈 敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操 作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。 

4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能 混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說 明才會得到最佳的檢測結(jié)果。


相關(guān)產(chǎn)品:



本試劑盒只供體外研究使用,不用于臨床診斷 


猴血紅蛋白C(HbC)酶聯(lián)免疫試劑盒    



本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿等。 

有效期:6 個月 

保存條件:2-8℃ 




試劑盒組成: 


b0f4ad4280f6df1fdd9a97bc8ceec2e.png



備注: 



1. (96T/48T)打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全。 

2. 標準品濃度依次為:200、100、50、25、12.5、0 μg/mL 

3. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提 供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取 50μL 樣本上樣即可。 當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本希釋液 將標本進行適當稀釋后再進行實驗。 


檢測前準備工作: 


1. 請?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。 

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象; 放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。 可將 20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成 400ml 工作濃度的洗滌液,未用完的放回 4℃ 

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份 20× 洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水。


猴血紅蛋白C(HbC)酶聯(lián)免疫試劑盒   

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實驗原理: 


試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)。往預先包被的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP 標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物 TMB顯色,TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


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實驗所需自備試驗器材: 


1. 酶標儀(450nm) 

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、 200-1000uL 

3. 37℃恒溫箱 

4. 蒸餾水或去離子水 


樣本處理及要求: 


1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時 或 4℃過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或 將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 

2. 血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在 采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8℃ 1000×g 離心 15 分鐘,取上 清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免 反復凍融。 

3. 組織勻漿:用預冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除 殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重 后將組只剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS, 具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充 分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超 聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。

4. 細胞培養(yǎng)物上清:請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢 測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 

5. 其它生物標本:1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測。 

6. 樣品外觀:樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。 

7. 樣品保存:樣品收集后若在 1 周內(nèi)進行檢測的可保存于 4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃ (1 個月內(nèi)檢測),或-80℃(6 個月內(nèi)檢測),避免反復凍 融,標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進 行此項檢測。 


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注意事項: 


1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所 有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷 藏保存試劑。 

2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡 量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。 

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。 

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不 能使用。 

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。 

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。 

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強 烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物 活性。 

9. 不能使用過期產(chǎn)品。 

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的 程序處理樣品和檢測裝置。 


操作步驟:

 

1.從室溫平衡 60min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板 條用自封袋密封放回 4℃。 

2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準 品 50μL。 

3.樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。樣本不足, 或者樣本濃度過高,可用樣本希釋液做稀釋。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化 物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應 孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL), 靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。 

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 

7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處 測定各孔的 OD 值。 





實驗結(jié)果計算: 


繪制標準曲線:以所測標準品的 OD 值為橫坐標,標準品的濃 度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得 到直線回歸方程,將樣品的 OD 值代入方程,計算出樣品的濃 度。 



 試劑盒性能: 


1. 檢測范圍:1.32 μg/mL –200 μg/mL。 

2. 靈敏度:檢測濃度小于 0.78 μg/mL。 

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。 

4. 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10% ,板間變異系數(shù)小于 15% 。


 技術(shù)小提示: 


1. 當混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。 

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同 試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移 液槽。 

3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。 

4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色,請避光保存;假如 微孔板后,將由物色變成不同深度的藍色。 

5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致;加入終止液 后,孔內(nèi)顏色由藍變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體 未混勻;請充分混合。 


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說明: 


1. 由于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供 的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定 的質(zhì)量技術(shù)風險。 

2. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及 當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務必準備充足的標本備份。 

3. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈 敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操 作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。 

4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能 混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說 明才會得到最佳的檢測結(jié)果。


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