猴神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)酶聯(lián)免疫試劑盒  

產(chǎn)品包裝：盒裝

性狀：瓶裝液體

規(guī)格：96T/48T

保存條件：2-8℃

保存期限：6個月

運輸條件：2-8℃低溫運輸，用干冰或者生物冰袋低溫運輸。

猴神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)酶聯(lián)免疫試劑盒 

   標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi)，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N"倍，標本的濃度應再乘以“N"。 

   標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。 

   生物su標記抗體的稀釋原則：臨用前以生物su標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su標記抗體加990μl生物su標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。 

   辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

實驗步驟

1. 抗原包被：將抗原溶液加入到酶標板孔中，包被抗原，使其在孔底形成一層薄膜。

2. 清洗：清洗酶標板，去除未結合的抗原和其他雜質(zhì)。

3. 阻斷：加入阻斷液，封閉酶標板孔中的非特異性結合位點，以減少非特異性結合。

4. 清洗：清洗酶標板，去除未結合的阻斷液和其他雜質(zhì)。

5. 加樣：加入待測樣本，使其與抗原發(fā)生特異性結合。

6. 清洗：清洗酶標板，去除未結合的樣本和其他雜質(zhì)。

7. 加酶標抗體：加入酶標記的抗體，使其與特異性結合的樣本中的待測物質(zhì)發(fā)生反應。

8. 清洗：清洗酶標板，去除未結合的酶標抗體和其他雜質(zhì)。

9. 顯色反應：加入底物溶液，發(fā)生酶催化反應，產(chǎn)生有色產(chǎn)物。

10. 終止反應：加入終止液，停止酶催化反應。

11. 檢測：用酶標儀測定各孔的光密度值，記錄數(shù)據(jù)。

ELISA試劑盒實驗數(shù)據(jù)的計算處理方法

1、擬和曲線：

輸入第一行： 濃度值， 如0 10 50 100 400

輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42

選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進入圖表向?qū)?，在“標準類?中選擇“xy散點圖";在“子圖表類型"中選擇“折線散點圖"，按“下一步";選擇“系列產(chǎn)生在行"，按“下一步";數(shù)據(jù)標志，可以填寫：如數(shù)據(jù)y軸，OD值;數(shù)據(jù)x軸，濃度;按下一步，點擊完成?？傻们€圖。

單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢線"，在類型中，選擇多項式;在選項中，選擇顯示公式，選擇顯示R平方值。

得到公式和R平方值。

也可以用上面說的方法： 雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。

2、計算濃度：

第一次實驗：

標準曲線為：

y = -4E-05x2 + 0.026x

R2 = 0.9745

為例，已知OD值，計算濃度。

由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：

4E-05x2 -0.026x +y=0

ax2 +bx +y=0

注意事項

在進行ELISA檢測時，需要注意以下幾點：

1. 保證試劑盒的質(zhì)量：選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認證的試劑盒，避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。

2. 標準化操作：按照試劑盒說明書進行標準化操作，避免操作過程中的人為誤差。

3. 避免交叉污染：在實驗過程中，要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染，以免影響檢測結果的準確性。

4. 溫度控制：ELISA檢測需要在恒溫條件下進行，因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準確性。

5. 空白吸光度值：在實驗過程中，要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性，避免其對檢測結果的影響。

6. 實驗數(shù)據(jù)的處理：對實驗數(shù)據(jù)進行正確的處理和分析，包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等，以確保結果的準確性和可靠性。

7. 質(zhì)量控制：在實驗過程中，應進行必要的質(zhì)量控制，如定期進行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等，以確保實驗室檢測結果的準確性。

ELISA試劑盒的作用

ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒，例如抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測試劑盒。

ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結合反應，以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。

ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡便、安全、快速等優(yōu)點，可以用于檢測類風濕因子、病毒、細菌等，在臨床診斷、科研和生物制品檢測等領域具有廣泛的應用。

公司簡介

     上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。總部位于上海，并在全國設有經(jīng)銷或代理機構。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務確立了“篤瑪生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物"已經(jīng)得到全國科研工作者的認可。

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