豬胰多肽(PP) ELISA 試劑盒 

本試劑盒基于檢測樣本的特異性抗體包被酶標(biāo)板，加入待測樣本，樣本與包被在酶標(biāo)板上的特異性抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。清洗后加入酶標(biāo)二抗，與免疫復(fù)合物結(jié)合，形成完整的三明治復(fù)合物。再加入底物溶液，底物在酶的作用下變色，顏色的深淺與樣本的濃度呈正相關(guān)。后加入終止液，使反應(yīng)停止，在450nm波長下測量各孔的光密度值（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本的濃度。

豬胰多肽(PP) ELISA 試劑盒 

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒組成

實驗步驟

1. 準(zhǔn)備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應(yīng)孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng)：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。

注意事項

在進(jìn)行ELISA檢測時，需要注意以下幾點：

1. 保證試劑盒的質(zhì)量：選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒，避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。

2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作：按照試劑盒說明書進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作，避免操作過程中的人為誤差。

3. 避免交叉污染：在實驗過程中，要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染，以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 溫度控制：ELISA檢測需要在恒溫條件下進(jìn)行，因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。

5. 空白吸光度值：在實驗過程中，要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性，避免其對檢測結(jié)果的影響。

6. 實驗數(shù)據(jù)的處理：對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析，包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

7. 質(zhì)量控制：在實驗過程中，應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制，如定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等，以確保實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

試劑盒性能：

1. 檢測范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：檢測濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點

ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點主要包括：

1.操作簡單：該方法只需要一步操作即可完成，操作過程簡單明了，易于掌握。

2.快速：ELISA90分鐘一步法可以在短時間內(nèi)完成，適合于大批量樣品的快速檢測。

3.特異性高：該方法采用特定的抗體或抗原進(jìn)行固定和檢測，因此具有較高的特異性。

4.靈敏度高：ELISA90分鐘一步法具有較高的靈敏度，可以檢測出較低濃度的抗原或抗體。

5.重復(fù)性好：該方法的重復(fù)性較好，結(jié)果較為穩(wěn)定。

6.安全性高：ELISA90分鐘一步法不使用放射性同位素等有害物質(zhì)，因此具有較高的安全性。

需要注意的是，ELISA90分鐘一步法也存在一些缺點，例如可能會受到非特異性干擾因素的影響，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。此外，該方法的試劑成本較高，不適合于小規(guī)模樣品的檢測。

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