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簡要描述:豬腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724) ELISA 試劑盒 質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。您只需提供代測(cè)樣本,七個(gè)工作日內(nèi)即可為您提供代測(cè)數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
豬腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724) ELISA 試劑盒
本試劑盒基于檢測(cè)樣本的特異性抗體包被酶標(biāo)板,加入待測(cè)樣本,樣本與包被在酶標(biāo)板上的特異性抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。清洗后加入酶標(biāo)二抗,與免疫復(fù)合物結(jié)合,形成完整的三明治復(fù)合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下變色,顏色的深淺與樣本的濃度呈正相關(guān)。后加入終止液,使反應(yīng)停止,在450nm波長下測(cè)量各孔的光密度值(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本的濃度。
豬腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724) ELISA 試劑盒
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 準(zhǔn)備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復(fù)至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應(yīng)孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時(shí)。
4. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標(biāo)二抗:每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應(yīng):每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
注意事項(xiàng)
在進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
1. 保證試劑盒的質(zhì)量:選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒,避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作:按照試劑盒說明書進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作,避免操作過程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實(shí)驗(yàn)過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測(cè)需要在恒溫條件下進(jìn)行,因此要確保實(shí)驗(yàn)過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。
5. 空白吸光度值:在實(shí)驗(yàn)過程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。
6. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理:對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析,包括對(duì)異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
7. 質(zhì)量控制:在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)進(jìn)行必要的質(zhì)量控制,如定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)等,以確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
試劑盒性能:
1. 檢測(cè)范圍:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 靈敏度:檢測(cè)濃度小于0.78 nmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點(diǎn)
ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點(diǎn)主要包括:
1.操作簡單:該方法只需要一步操作即可完成,操作過程簡單明了,易于掌握。
2.快速:ELISA90分鐘一步法可以在短時(shí)間內(nèi)完成,適合于大批量樣品的快速檢測(cè)。
3.特異性高:該方法采用特定的抗體或抗原進(jìn)行固定和檢測(cè),因此具有較高的特異性。
4.靈敏度高:ELISA90分鐘一步法具有較高的靈敏度,可以檢測(cè)出較低濃度的抗原或抗體。
5.重復(fù)性好:該方法的重復(fù)性較好,結(jié)果較為穩(wěn)定。
6.安全性高:ELISA90分鐘一步法不使用放射性同位素等有害物質(zhì),因此具有較高的安全性。
需要注意的是,ELISA90分鐘一步法也存在一些缺點(diǎn),例如可能會(huì)受到非特異性干擾因素的影響,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。此外,該方法的試劑成本較高,不適合于小規(guī)模樣品的檢測(cè)。
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