人組織因子(TF)酶聯(lián)免疫試劑盒

試驗原理

酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

人組織因子(TF)酶聯(lián)免疫試劑盒

人組織因子(TF)酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。

3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。

9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4,請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本O D值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(xn)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7,嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

酶聯(lián)免疫吸附法的作用

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的免疫學技術，常用于醫(yī)學、生物領域中的抗原或抗體檢測。其作用包括：

1.疾病診斷：ELISA可以用于檢測體液或組織樣本中的特定分子，如病毒抗原、細菌抗原、腫瘤標志物等，協(xié)助醫(yī)生進行疾病診斷。

2.病毒抗體檢測：ELISA可以用于檢測血液中的病毒抗體，如乙型肝炎表面抗體、人類免疫缺陷病毒抗體等，用于流行病學調(diào)查和臨床診斷。

3.藥物療效評估：ELISA可以用于檢測用藥后的藥物療效以及用藥劑量對身體的化學反應等，幫助醫(yī)生對患者進行個性化治療。

4.生物分子檢測：ELISA可以用于檢測生物分子，如蛋白質(zhì)、多肽、激素等，在生物醫(yī)學研究領域得到廣泛應用。

總之，酶聯(lián)免疫吸附法在醫(yī)學、生物領域中具有廣泛的應用價值，是臨床診斷和治療中重要的輔助手段。