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簡要描述:人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒:質(zhì)量穩(wěn)定,準確性高。篤瑪生物全程提供技術指導,確保您實驗結果的準確性還提供免費代測服務。您只需提供代測樣本,七個工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
ELISA試劑盒的組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的FMS樣激酶3配體(Flt3L),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中FMS樣激酶3配體(Flt3L)含量的測定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 78-95% | 78-101% | 86-102% | 86-95% |
EDTA plasma(n=5) | 82-95% | 89-99% | 88-102% | 84-102% |
heparin plasma(n=5) | 96-105% | 80-101% | 83-93% | 87-96% |
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數(shù)。
將FMS樣激酶3配體(Flt3L)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的FMS樣激酶3配體(Flt3L)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入的FMS樣激酶3配體(Flt3L)抗體,將未結合的抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次洗滌后加入底物。加入底物后會產(chǎn)生輝光型光信號。發(fā)射光強度和樣品中的FMS樣激酶3配體(Flt3L)呈正相關。用化學發(fā)光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。
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