人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 

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試劑盒特點(diǎn):

1、靈敏度:有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的能力;

2、特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測(cè)定結(jié)果升

高，可能導(dǎo)致假陽(yáng)性，所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo);

3、精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍:

4、準(zhǔn)確度:通過(guò)添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià):

5、簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下，實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好，在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)

單明了，定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單;

6、安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性;

7、經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本，而市場(chǎng)價(jià)格比較合理;

8、試劑評(píng)價(jià):需要有確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。

ELISA試劑盒自備物品

1.酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱)

2.微量加液器及吸頭，EP管

3、蒸餾水或去離子水，全新濾紙。

人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 

ELISA試劑盒的作用

ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒，例如抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。

ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。

ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn)，可以用于檢測(cè)類風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等，在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。

試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及解析

 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。

a.原因：室溫太高(>25℃)。

解決辦法： 若無(wú)法降低室內(nèi)溫度，請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。

b.原因：底物溶液受到污染。

解決辦法： 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色，請(qǐng)不要再使用。

c.原因：反應(yīng)時(shí)間超過(guò)太久。

解決辦法：請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。

d.原因：酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。

解決辦法：使用過(guò)的吸頭應(yīng)立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過(guò)的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無(wú)殘留)

陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。

a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。

解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。

b.原因：洗板過(guò)程發(fā)生問(wèn)題(同2-f.)。

解決辦法：請(qǐng)參考2-f.

c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。

解決辦法： 請(qǐng)參考2-d.

 ELISA的發(fā)展史：

1√ 目前，分子生物學(xué)正在并肯定會(huì)讓我們對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí)，其對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的。

2√ ELISA測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展，而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。

3√ ELISA試劑盒它使我們對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定變得輕而易舉，并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。