人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒    

試劑盒性能

1. 特異性高：由于是抗原抗體的特異性結合，因此試驗的特異性很高，能夠排除其他物質的干擾。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大提高，能夠檢測出微量的抗原或抗體。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易掌握，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。

用途：

主要用于定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其他相關生物液體中的含量。
產品保存：

2-8℃、有效期6個月,我司單核細胞趨化蛋白1(MCP1)酶聯(lián)試劑盒均為批次，您可放心選購。
規(guī)格：48T/96T
有效期：6個月
優(yōu)勢：靈敏性高，性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實驗原理

      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。

2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素)，阻止非特異性蛋

白質結合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或抗體的樣本。

4)洗滌:去除未結合的物質。

5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標記檢測抗體。

6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測抗體。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。

人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒   

標本的采集及保存

1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結果分析

根據試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值，利用標準品繪制的標準曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據處理，通過計算得到待測樣品的濃度。

性能:

1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2．靈敏度：檢測濃度小于10 pg/ml。

3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4．重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于15%。

試劑盒特點
1.專一性強。

抗原與抗體的反應是專一反應，而酶技術以反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。

由于抗體聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射測定法。
3.樣品易保存。

經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。

對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。

溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行酶技術的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。

如有成千上萬份樣品需要進行檢測，酶技術都能在較短時間內完成。
7.儀器和試劑簡單。

對沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產應用單位均易購置.

*特別提醒*

1.取樣和存樣所用的凍存管、離心管、吸頭等需高溫滅菌處理；

2.所有存樣管口需以封口膜封好；

3.所有樣品管壁需要用防水記號筆清晰標明編號（便于區(qū)分即可）；

免責聲明 

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔