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簡要描述:兔脂肪酸結(jié)合蛋白3(FABP3)ELISA試劑盒:質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測服務(wù)。您只需提供代測樣本,七個(gè)工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
四大特性:
1.特異性強(qiáng):不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高: 實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:在這一進(jìn)程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確?;旌?。
一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,跨過一星期測定的需低溫冰存。
1、血清:用無菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。
2、尿液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
如何使用ELISA試劑盒
如:加樣器不確,尤其10ul以下的加樣器,對結(jié)果影響大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢,下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法:
1.在使用過程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等);
2.仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
3.必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。
4.認(rèn)真閱讀使用說明書。
5.樣品加樣
(1)加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。
(2)加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
6.洗滌
(1)每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
(2)選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
(3)可選用塑料洗滌瓶。
7.加酶反應(yīng)
(1)包括陰性對照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
(2)包括陽性對照在內(nèi),各孔均無顯色;
(3)陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常;
(4)有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽性困難。
ELISA試劑盒在使用之時(shí)還需要注意哪些問題?
1. elisa試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物a、b液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物a應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物b對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取od值。
8. 加入elisa試劑盒的順序應(yīng)一致,elisa試劑盒以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
科研ELISA檢測過程中的注意事項(xiàng)
1、要移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但*有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果穩(wěn)定。
4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
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公司簡介
上海篤瑪生物科技有限公司主要經(jīng)營生產(chǎn)ELISA試劑盒,抗體,原料藥,植物提取物,品質(zhì),價(jià)格。公司秉承價(jià)格低,品質(zhì)好,客戶之上的原則努力將生命科學(xué)產(chǎn)品提供給廣大的科研工作者。
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免責(zé)聲明
試劑盒供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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