綿羊生長相關(guān)蛋白43(GAP43) ELISA 試劑盒 

如何更好使用ELISA試劑盒
如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對(duì)結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢，下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法：
1．在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；
2．仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。
4．認(rèn)真閱讀使用說明書。
5．樣品加樣
（1）加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯(cuò)加。
（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
6．洗滌
（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
（3）可選用塑料洗滌瓶。
7．加酶反應(yīng)
（1）包括陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
（2）包括陽性對(duì)照在內(nèi)，各孔均無顯色；
（3）陽性對(duì)照不顯色，而其它樣本顯色正常；
（4）有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽性困難。

特別說明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃，需長時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.

ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復(fù)性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
5、可檢測指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內(nèi)分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等；
6、質(zhì)量保證，限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL，37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入100μL化抗體工作液，37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液，37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液，37°C孵育5分鐘左右
7.立即測定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計(jì)算




ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進(jìn)程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標(biāo)本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確?；旌?。

一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，跨過一星期測定的需低溫冰存。
1、血清：用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。
2、尿液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
3、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

注：
1.以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個(gè)月，-80℃不應(yīng)超過2個(gè)月。

2.如果樣本種類在實(shí)驗(yàn)手冊中沒有提到，一般需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定試劑盒能被用來檢測您的樣品。

3.用于組織或細(xì)胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4.由于其他來源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配（例如，抗體的目標(biāo)，是構(gòu)象表位而不是線性表位），其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無法被本公司試劑盒所識(shí)別。

5.由于包括細(xì)胞活力，細(xì)胞數(shù)量，以及采樣時(shí)間等因素，從細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取的樣品，可能無法被檢測。

6.建議采用新鮮樣品來檢測，不要存放時(shí)間過長。否則，蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生，*終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

7.標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測

綿羊生長相關(guān)蛋白43(GAP43) ELISA 試劑盒 

ELISA試劑盒在使用之時(shí)還需要注意哪些問題？
1. elisa試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物a應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物b對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取od值。
8. 加入elisa試劑盒的順序應(yīng)一致，elisa試劑盒以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
  

科研ELISA檢測過程中的注意事項(xiàng)
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但*有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的后可長期保存。
12、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。
16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
18、對(duì)結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。



ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的計(jì)算處理方法
1、擬和曲線：
輸入第一行： 濃度值， 如0 10 50 100 400
輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進(jìn)入圖表向?qū)В凇皹?biāo)準(zhǔn)類型"中選擇“xy散點(diǎn)圖";在“子圖表類型"中選擇“折線散點(diǎn)圖"，按“下一步";選擇“系列產(chǎn)生在行"，按“下一步";數(shù)據(jù)標(biāo)志，可以填寫：如數(shù)據(jù)y軸，OD值;數(shù)據(jù)x軸，濃度;按下一步，點(diǎn)擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢線"，在類型中，選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中，選擇顯示公式，選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法： 雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。

2、計(jì)算濃度：
第一次實(shí)驗(yàn)：
標(biāo)準(zhǔn)曲線為：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例，已知OD值，計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0



ELISA試劑盒持續(xù)熱銷的原因
時(shí)光飛逝，轉(zhuǎn)眼公司成立已經(jīng)有好幾個(gè)年頭了，很重要，宣傳很重要，而自身品質(zhì)更重要，從客戶的角度出發(fā)最重要！注重細(xì)節(jié)、注重服務(wù)，并且品質(zhì)足夠硬，相信通過我們不斷的完善與努力定能夠走的更久、更遠(yuǎn)、更好！

1. 我們堅(jiān)持掌握技術(shù)和信息，并國內(nèi)行業(yè)方向。

2. 我們堅(jiān)持保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，可靠性。

3. 我們堅(jiān)持及時(shí)了解客戶需求，

一直保持跟國內(nèi)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和多家科研單位緊密合作關(guān)系。

四大特性：    
1．特異性強(qiáng)：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3．穩(wěn)定性高： 實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。
4．超靈敏度：檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。 


公司簡介
上海篤瑪生物科技有限公司主要經(jīng)營生產(chǎn)ELISA試劑盒，抗體，原料藥，植物提取物，價(jià)格優(yōu)勢。公司秉承，客戶之上的原則努力將優(yōu)秀的生命科學(xué)產(chǎn)品提供給廣大的科研工作者。
公司ELISA試劑盒采用抗體，一步孵育，一步洗板，操作時(shí)間僅需90分鐘，就能得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。剛開起的酶聯(lián)板孔會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響，您盡可放心使用。本司專業(yè)研發(fā)各種種屬ELISA試劑盒


免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號(hào)不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。