綿羊細(xì)胞周期蛋白23(CDC23) ELISA 試劑盒  

如何更好使用ELISA試劑盒
如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對(duì)結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問(wèn)題呢，下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法：
1．在使用過(guò)程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國(guó)等）；
2．仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來(lái)水、礦泉水等。
4．認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。
5．樣品加樣
（1）加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯(cuò)加。
（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
6．洗滌
（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
（3）可選用塑料洗滌瓶。
7．加酶反應(yīng)
（1）包括陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
（2）包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi)，各孔均無(wú)顯色；
（3）陽(yáng)性對(duì)照不顯色，而其它樣本顯色正常；
（4）有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽(yáng)性困難。

特別說(shuō)明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃，需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.

ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復(fù)性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型；
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等；
6、質(zhì)量保證，限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL，37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入100μL化抗體工作液，37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液，37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液，37°C孵育5分鐘左右
7.立即測(cè)定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計(jì)算




ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進(jìn)程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標(biāo)本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確?；旌?。

一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。
1、血清：用無(wú)菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。
2、尿液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
3、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

注：
1.以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月，-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。

2.如果樣本種類(lèi)在實(shí)驗(yàn)手冊(cè)中沒(méi)有提到，一般需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定試劑盒能被用來(lái)檢測(cè)您的樣品。

3.用于組織或細(xì)胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4.由于其他來(lái)源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配（例如，抗體的目標(biāo)，是構(gòu)象表位而不是線性表位），其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無(wú)法被本公司試劑盒所識(shí)別。

5.由于包括細(xì)胞活力，細(xì)胞數(shù)量，以及采樣時(shí)間等因素，從細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取的樣品，可能無(wú)法被檢測(cè)。

6.建議采用新鮮樣品來(lái)檢測(cè)，不要存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。否則，蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生，*終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

7.標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)

綿羊細(xì)胞周期蛋白23(CDC23) ELISA 試劑盒 

如何更好使用ELISA試劑盒
如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對(duì)結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問(wèn)題呢，下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法：
1．在使用過(guò)程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國(guó)等）；
2．仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來(lái)水、礦泉水等。
4．認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。
5．樣品加樣
（1）加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯(cuò)加。
（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
6．洗滌
（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
（3）可選用塑料洗滌瓶。
7．加酶反應(yīng)
（1）包括陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
（2）包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi)，各孔均無(wú)顯色；
（3）陽(yáng)性對(duì)照不顯色，而其它樣本顯色正常；
（4）有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽(yáng)性困難。

特別說(shuō)明:
#.一周內(nèi)使用可存于4℃，需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃.

ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復(fù)性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型；
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等；
6、質(zhì)量保證，限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒
1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL，37°C孵育90分鐘
2.倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入100μL化抗體工作液，37°C孵育 60分鐘
3.洗滌3次
4.加入 100μL酶結(jié)合物工作液，37°C孵育 30分鐘
5.洗滌5次
6.加入100μL 發(fā)光底物混合液，37°C孵育5分鐘左右
7.立即測(cè)定各孔的化學(xué)發(fā)光值
8.結(jié)果計(jì)算




ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些
科研ELISA在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進(jìn)程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標(biāo)本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確保混和。

一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。
1、血清：用無(wú)菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。
2、尿液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
3、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無(wú)菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

注：
1.以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月，-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。

2.如果樣本種類(lèi)在實(shí)驗(yàn)手冊(cè)中沒(méi)有提到，一般需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定試劑盒能被用來(lái)檢測(cè)您的樣品。

3.用于組織或細(xì)胞裂解的化學(xué)裂解液中的某些化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4.由于其他來(lái)源的抗原可能和本公司試劑盒中使用的抗體不匹配（例如，抗體的目標(biāo)，是構(gòu)象表位而不是線性表位），其他一些制造商的非重組或重組蛋白可能無(wú)法被本公司試劑盒所識(shí)別。

5.由于包括細(xì)胞活力，細(xì)胞數(shù)量，以及采樣時(shí)間等因素，從細(xì)胞培養(yǎng)上清液提取的樣品，可能無(wú)法被檢測(cè)。

6.建議采用新鮮樣品來(lái)檢測(cè)，不要存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。否則，蛋白質(zhì)降解和變性可能發(fā)生，*終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

7.標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)