猴磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)酶聯(lián)免疫試劑盒

實驗原理

ELISA試劑盒的實驗原理是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎(chǔ)上的，同時結(jié)合了酶的催化作用。其基本原理包括三個方面：

1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性。

2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學和酶學活性。

3.酶結(jié)合物與相應抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。

ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎(chǔ)上，因而具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應，產(chǎn)生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。

產(chǎn)品包裝：盒裝

性狀：瓶裝液體

規(guī)格：96T/48T

保存條件：2-8℃

保存期限：6個月

運輸條件：2-8℃低溫運輸，用干冰或者生物冰袋低溫運輸。

實驗步驟

1. 抗原包被：將抗原溶液加入到酶標板孔中，包被抗原，使其在孔底形成一層薄膜。

2. 清洗：清洗酶標板，去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。

3. 阻斷：加入阻斷液，封閉酶標板孔中的非特異性結(jié)合位點，以減少非特異性結(jié)合。

4. 清洗：清洗酶標板，去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。

5. 加樣：加入待測樣本，使其與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。

6. 清洗：清洗酶標板，去除未結(jié)合的樣本和其他雜質(zhì)。

7. 加酶標抗體：加入酶標記的抗體，使其與特異性結(jié)合的樣本中的待測物質(zhì)發(fā)生反應。

8. 清洗：清洗酶標板，去除未結(jié)合的酶標抗體和其他雜質(zhì)。

9. 顯色反應：加入底物溶液，發(fā)生酶催化反應，產(chǎn)生有色產(chǎn)物。

10. 終止反應：加入終止液，停止酶催化反應。

11. 檢測：用酶標儀測定各孔的光密度值，記錄數(shù)據(jù)。

猴磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)酶聯(lián)免疫試劑盒

試劑盒組成

實驗注意事項

1. 抗原和抗體的儲存：應嚴格按照說明書要求存放抗原和抗體，避免反復凍融和長時間暴露在高溫環(huán)境中。同時要保證試劑盒未過期，以獲得可靠的實驗結(jié)果。

2. 加樣技術(shù)：加樣時應保證加入的體積準確且不產(chǎn)生氣泡，避免加在孔壁的邊緣，以免影響與固相表面的接觸。加樣時應在每孔的旁邊放置一個加樣對照孔，以監(jiān)測加樣的準確性和重復性。

3. 溫育：溫育是ELISA實驗中的重要步驟，溫育時間和溫度的控制對于抗原抗體反應的進行和結(jié)果的影響至關(guān)重要。必須嚴格按照說明書要求進行溫育，并注意保持恒溫狀態(tài)。

4. 洗滌：洗滌是ELISA實驗中重要的一步，它可以去除未結(jié)合的物質(zhì)，提高檢測的特異性和靈敏度。洗滌時應保證每次洗滌時間充足，并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時要避免在洗滌過程中產(chǎn)生氣泡，以免影響洗滌效果。

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標準品濃度及對應的OD值，利用標準品繪制的標準曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算得到待測樣品的濃度。

試劑盒 必知說明：

1）只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，

2）不能混用其他制造商的產(chǎn)品，只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到好的檢測結(jié)果。

3）由于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風險。

4）實驗結(jié)果與試劑盒的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān)。

5）請務必準備充足的標本備份。

6）不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，

如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

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