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簡要描述:猴轉錄激活因子7(ATF7)酶聯(lián)免疫試劑盒 產(chǎn)品規(guī)格分為96T(孔)、48T(孔),貨期短,質(zhì)量優(yōu)且免費提供ELISA 試劑盒代測服務。同時我們?yōu)槟峁〆lisa定量檢測試劑盒價格、用途、貨號 、規(guī)格、說明書、等相關操作說明,詳情可致電我司銷售人員!
猴轉錄激活因子7(ATF7)酶聯(lián)免疫試劑盒
樣本實驗準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,最好-70℃凍存?zhèn)溆谩吮緫苊夥磸蛢鋈凇?/span>
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
猴轉錄激活因子7(ATF7)酶聯(lián)免疫試劑盒
實驗步驟
1. 抗原包被:將抗原溶液加入到酶標板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一層薄膜。
2. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的抗原和其他雜質(zhì)。
3. 阻斷:加入阻斷液,封閉酶標板孔中的非特異性結合位點,以減少非特異性結合。
4. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的阻斷液和其他雜質(zhì)。
5. 加樣:加入待測樣本,使其與抗原發(fā)生特異性結合。
6. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的樣本和其他雜質(zhì)。
7. 加酶標抗體:加入酶標記的抗體,使其與特異性結合的樣本中的待測物質(zhì)發(fā)生反應。
8. 清洗:清洗酶標板,去除未結合的酶標抗體和其他雜質(zhì)。
9. 顯色反應:加入底物溶液,發(fā)生酶催化反應,產(chǎn)生有色產(chǎn)物。
10. 終止反應:加入終止液,停止酶催化反應。
11. 檢測:用酶標儀測定各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 23ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
結果計算方法如下
1.計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX)。
2.兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值,例如0.400,試驗才有效。
3.3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。
4.陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05。
5.標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。
需要注意的是,試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
注意事項
1. 實驗前請仔細閱讀本試劑盒的使用說明,確保所有材料、器具和試劑準備齊全。
2. 為保證實驗結果的準確性,請務必遵循實驗步驟進行操作,并注意控制實驗條件的一致性。
3. 實驗過程中請勿觸摸酶標板上的酶標抗體區(qū)域,以免影響實驗結果。
4. 實驗結束后請及時清洗并整理實驗器具,避免交叉污染。
5. 本試劑盒僅供體外診斷使用,使用前請仔細閱讀說明書,如有疑問請及時聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術人員。
試劑盒性能
1. 檢測范圍:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 靈敏度:檢測濃度小于0.78 nmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
合作單位
中國醫(yī)科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫(yī)學院、中國農(nóng)業(yè)大學
天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學、香港大學
云南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院
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